银耳菌种的获取方法

获得银耳菌种的方法主要有担子孢子粒分离法、组织分离法和段木分离法。 1. 孢子弹射器。这是一种通过从新鲜、成熟的子实体中自动排出担子孢子来获得纯菌株的方法。以个大、色白、无病虫害的新鲜银耳为种穗。将银耳用无菌水冲洗几次，然后用无菌纱布或吸水纸吸干银耳表面的水分。因为如果耳片表面有一层薄薄的水，会影响银耳担子孢子的喷出，容易污染上层细菌。然后剪一小块种穗，使其放入三角瓶或试管时不碰到瓶壁或管壁，然后用不锈钢小钩钩住小耳片，挂起来将其迅速放入三角瓶或试管中，同时注意不要让种穗接触培养基表面，防止污染细菌，用棉塞盖上，然后置于20- 25C。 24小时后，从耳片中喷出的担孢子会落在光滑的培养基上。基底表面形成雾状孢子印。此时，在无菌箱或无菌室中，取出悬浮在瓶中的耳片，用棉塞塞住，移至20-25的室内培养。 2-3天后，培养基表面变细。会有许多乳白色、糊状的小菌落。这是银耳的酵母状分生孢子。当培养基上出现酵母样分生孢子菌落时，为防止和减少污染，应尽快进行纯化，即挑取少量不含杂菌的银耳酵母样分生孢子，转移他们到新的试管中进行培养。无论银耳担子孢子还是酵母状分生孢子都不易萌发成菌丝，因此很难直接用于生产，目前已很少使用。但要获得银耳有性繁殖的后代，必须采用担子孢子分离法，萌发成单核菌丝，然后进行配对实验。 2.组织分离法。与香菇、平菇不同，银耳组织分离法操作难度大，实际意义不大。因为耳片一旦糊化，就不容易再长菌丝了。而且，种在木头上或野生的银耳，长期暴露在外界，各种细菌肯定会附着在耳塞上。附着的杂菌不易洗掉，药物表面不易消毒，容易造成银耳和杆状菌一起死去。只有位于树皮和木质部之间的肥大的木耳比较容易分离得到银耳菌的纯菌丝体。但从穗基分离出的纯银耳菌丝往往呈鹅黄色或橙黄色，不是纯白色，而且菌丝生长速度比较慢，效果不理想。 3.段分离法。利用长银耳子实体的节材（简称木耳）分离，是目前获得具有实用价值的银耳菌种最重要的方法。真菌分离法的主要技术是消除真菌对真菌的干扰，防止分离时被真菌污染。银耳菌丝和香灰菌丝必须分开。主要步骤如下： （一）菌种选择种植第一批和第二批银耳时，取耳长最长、品质最好（特别是宽度和白色）、最少的银耳一小段。量的细菌，作为分离材料。分离后的物料风干并用熏蒸剂驱除杀虫剂（特别是螨类）后，移入无菌箱或无菌室进行分离。 (2)耳材的灭菌将耳材锯成2-4cm厚的木轮，剥去树皮和耳根，放入接种箱(室)内，用0.1%的水银升液喷洒在耳材表面水或70% 酒精擦拭消毒。本领域技术人员也可以在不进行表面灭菌的情况下进行分离。 (3)黑木耳选种将黑木耳从黑木耳基部长出的地方纵剖成两截。然后，在穗基长出的正下方的木头里面刨出非常细小的木屑粉（不能用小木片，接种块越小，获得银耳纯菌的几率越大，接种块越大获得香灰菌丝体，或香灰菌丝体与少许银耳菌丝体混合的机会），接种于试管中的培养基表面。接种后将试管置于20-28室温下培养，数日后接种块周围开始长出菌丝。